液相色譜因流動相引起的常見問題

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一些因流動相引起的常見問題

01

流動相脫氣不充分

流動相受熱，或者流動相不同組分混合時會有氣體產生，氣泡進入泵內引起壓力波動，增加噪音，色譜圖上出現毛刺。可試用下列方法解決問題：流動相再脫氣；采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用；改系統內混合為系統外預混合。

流動相供給不暢

02

流動相用完，管道中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)。應經常觀察儲液器中流動相的量，加足流動相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底，儲液器蓋上留一小孔正好夾住進液管，使其不能上下移動。

過濾器阻塞引起管道和泵腔空化，壓力不穩(wěn)。過濾器被微粒所阻塞或長霉，去掉過濾器后如果系統運轉正常，說明已找出問題，換上新的過濾器則可。有時候換上新的過濾器仍然不暢，那就需要查查流動相的制備過程，或者換大孔徑的過濾器。不管如何，流動相都需要重新過濾。

流速過高、阻力大，造成空化現象，這是由于過濾器孔徑、管道內徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10mL/min，常會出現這種現象。

使用下列方法解決：

（1）使用低流速；

（2）換大孔徑的過濾器；

（3）增加進液管道內徑；

（4）抬高或加壓儲液器；

（5）不用過濾器，但流動相一定要先過濾；

（6）儲液器蓋子太緊，在儲液器內形成真空，打出的流動相不連續(xù)。應松開蓋子或留有1mm的縫隙；

（7）進液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液，注意調整進液管道或更換新的。其它問題包括滲漏或接頭松動、泵部件損壞等，都能引起供液不正常。

03

流動相和儲液器被污染

由于污染，噪音越來越大，檢測器基線上升。污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統，而再以穩(wěn)定的濃度流出來，所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時弱流動相可以使污染物聚在柱頂，流動相強度增加后污染物可能被洗脫出來一個大的偽峰。有時基線噪音突然增大或突然提高，都是因為反復加進新的流動相或系統用得太久（通宵）所造成的。新加進的流動相有污染物或者流動相長霉，繁殖了細菌。

臟的儲液器會污染清潔的流動相。每種流動相備有專用的儲液器，或者定期報廢儲液器。

流動相污染來自這幾個方面

04

試劑質量不高，玻璃器皿不合格；

微生物的影響；

配制流動相時操作不當等；

因此要求高純度化學試劑和HPLC級溶劑；

玻璃器皿按規(guī)定清洗干凈；

為防止微生物生長，每天要用甲醇清洗系統；

懷疑系統內生長了微生物，可用稀硝酸沖洗即可（注意不要損壞柱和管道系統）；

真空脫氣時防止泵油帶入流動相；

用清潔的惰性塞子、攪棒、過濾器和玻璃器皿配制流動相；

已經污染的流動相一定要廢棄掉。

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